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細胞爬片-滴片
爬片又名細胞爬片,是指讓玻片浸在細胞培養(yǎng)基內,細胞在玻片上生長,主要用于組織學,免疫組織化學,bing凍切片,細胞涂片,原位雜交等。
1、爬片前期處理:
①爬片固定:在孔中滴加3ml固定液,固定15min。吸凈孔中固定液,純水水洗3次(每次水洗的時候用尖頭鑷子挑起爬片清洗,然后用吸管吸凈純水,β半乳糖染色使用專用的固定液。)
②爬片破膜:在孔中滴加3ml破膜液,破膜15min。吸凈孔中破膜液,純水水洗3次(每次水洗的時候用尖頭鑷子挑起爬片清洗,純水不吸出,留著后續(xù)使用)
(針對六孔板,其它孔板滴加適量的固定液和破膜液。)
2、爬片染色:
后續(xù)染色步驟同石蠟切片相同,染色時間適當延長,清洗或者更換染液使用巴氏吸管吸凈之前的染液。
3、爬片封片:
加入適量酒精或水(看染色過程中后一步是使用水還是酒精)后挑起爬片,爬片靠在孔邊緣,吸凈酒精后放置于65℃烤箱烘干15min。(染色過程中注意細胞爬片的方向,保證細胞面朝上和染液充分接觸)
從烤箱中取出裝有爬片孔板,在載玻片上寫下每個孔板的編號,在載玻片上滴加一滴中性樹膠后,用鑷子夾起對應編號的爬片,細胞面朝下封片。(封片過程中注意細胞爬片的方向,保證細胞面朝下封片)
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